【冷冻保护剂进展】抗冻肽AVD有效抑制冰晶损伤，细胞复苏率达95.7%

发布时间：

2025-06-05

在生物样本低温保存领域，冰晶损伤是导致细胞膜破裂和功能丧失的核心问题。传统冷冻保护剂二甲基亚砜（DMSO）存在细胞毒性，而天然抗冻蛋白因成本和免疫原性限制难以规模化应用。

近日，天津大学科研团队在《Engineering》发表研究，通过模拟南极细菌抗冻蛋白的“分子乐高”，设计出新型抗冻肽AVD。实验显示，添加AVD的冷冻细胞复苏率最高达95.7%，比传统方法提升3倍。这项技术或为器官冷冻保存、细胞治疗等领域提供关键解决方案。

抗冻机制解析：来自南极细菌的启发

南极冰缘细菌为抵御极端低温进化出抗冻蛋白（IBPs），其表面周期性排列的钩状结构域可与冰晶晶格形成分子互补。研究表明，这类蛋白通过拓扑匹配机制在冰水界面构建动态屏障，有效抑制冰晶异相成核。然而天然抗冻蛋白存在成本高、免疫排斥等缺陷。研究团队从233种抗冻蛋白中筛选出51种含重复基序的样本，通过进化树分析和分子动力学模拟，锁定关键氨基酸排列规律。“这就像破译自然界的抗冻密码，找到最精简有效的分子组合。”论文通讯作者张磊解释。

AVD设计：用“分子乐高”搭建冰晶盾牌

研究团队最终设计的AVD肽链仅含20个氨基酸，其核心是Thr6和Asn8两个关键位点，两者间距7.8埃（约为头发丝直径的十万分之一），恰好匹配冰晶棱柱面的氧原子间距。分子模拟显示，AVD能嵌入冰晶生长界面，使冰晶增速降低60%。更巧妙的是，Ser18位点通过氢键形成“辅助锁”，将结合稳定性提升40%。这种设计使AVD在浓度仅为1毫克/毫升时，冰晶面积抑制效果达到天然抗冻蛋白的86%。

低温保护验证：细胞复苏率从30%提高至95%

在零下80℃冷冻实验中，AVD展现出双重防护机制：既抑制冰晶生长，又稳定细胞膜钙离子通道。使用AVD冷冻的肺癌细胞（GLC-82）复苏率达95.7%，比未添加组提升3.1倍；免疫细胞（RAW264.7）复苏率从2.4%提升至34.9%。显微镜下，经AVD保护的细胞线粒体结构完整，增殖能力与新鲜细胞无差异。“这相当于给细胞穿上纳米级防冻服，既防外部冰晶穿刺，又维持内部离子平衡。”张磊比喻道。

尽管AVD效果显著，但其工业化仍面临挑战。目前化学合成1克AVD成本约500元，而冷冻一份细胞样本需10毫克，折合单次成本5元。相比之下，常用冷冻保护剂二甲基亚砜（DMSO）成本仅为0.1元。研究团队表示，正在开发生物合成工艺，目标将成本降低80%。此外，AVD对心肌细胞等特殊细胞类型的保护效果仍需验证。

“这项研究首次实现分子尺度的精准抗冻设计，为器官长期保存提供了全新解决方案。”国际低温生物学会主席Boris Rubinsky教授评价称。

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